Недавние исследования показали, что METTL1 повышен в плоскоклеточном раке кожи (cSCC) и играет онкогенную роль. В экспериментах in vitro было установлено, что ингибирование METTL1 значительно снижает выживаемость, миграцию и инвазию клеточных линий cSCC HSC-1 и A431. Кроме того, снижение METTL1 ослабило опухолеобразование cSCC у голых мышей. Механистически, METTL1 медирует модификацию m7G мРНК ATF4, повышая ее стабильность и экспрессию за счет активности метилтрансферазы. Наблюдалась положительная корреляция между ATF4 и METTL1 в опухолевых тканях cSCC. Переэкспрессия ATF4 отменила антиопухолевые эффекты снижения METTL1, что указывает на онкогенную роль METTL1 и механизмы модификации m7G как потенциальные терапевтические мишени для cSCC.
В подробном анализе экспрессии METTL1 была проведена иммуногистохимия (IHC) на парафиновых срезах из 36 образцов cSCC и 7 нормальных образцов, показав значительное повышение уровней METTL1 в опухолевых тканях по сравнению с нормальной кожей. Дополнительные оценки с использованием qRT-PCR показали постоянные увеличения уровней мРНК METTL1 в тканях cSCC по сравнению с нормальными контролями. Исследование также оценивало вовлеченность METTL1 в прогрессию опухоли, сравнивая его уровни белка и мРНК в клеточных линиях cSCC (HSC-1 и A431) с контролем кератиноцитов HaCaT, выявляя заметную гиперэкспрессию в клетках cSCC.
Чтобы исследовать роль METTL1 в прогрессии клеток cSCC, были созданы стабильные клеточные линии HSC-1 и A431 с уменьшением METTL1 с использованием shRNA. Успех снижения был подтвержден снижением уровней мРНК и белка METTL1, сопровождающимся уменьшением метилирования m7G. Последующие эксперименты показали, что снижение METTL1 привело к уменьшению жизнеспособности клеток, пролиферации и увеличению апоптоза в клетках cSCC.
Исследования in vivo с использованием модели ксенотрансплантата показали, что опухоли, образованные клетками с уменьшением METTL1, имели значительно более низкие темпы роста по сравнению с контрольной группой. Анализ RNA-seq показал, что снижение METTL1 привело к снижению 4017 генов, включая ключевые гены, связанные с метаболизмом гликолиза. Замечательно, что мРНК ATF4 была идентифицирована как объект для модификации m7G METTL1, при этом эксперименты подтвердили, что ее стабильность и экспрессия зависят от активности METTL1.
Эти результаты подчеркивают критическую роль METTL1 в поддержании выживаемости и пролиферации клеток cSCC через механизмы, опосредуемые ATF4, предполагая его потенциал в качестве терапевтической мишени в стратегиях лечения cSCC.